细胞免疫功能检测
白癜风自身免疫功能检测包括细胞功能检测和体液功能检测。
白癜风与患者自身的免疫系统有着密切的联系,免疫系统功能紊乱是导致白癜风发生、发展的一个重要原因。研究发现,进展期白癜风患者的抗黑素细胞抗体及细胞因子水平明显高于正常人与稳定期患者,进展期、泛发性寻常型白癜风患者的抗体滴度高于局限性患者。所以,自身免疫系统异常检测对医生辩证施治具有重要的参考价值。
免疫细胞功能检查主要包括:
①迟发性皮肤过敏试验。
迟发性皮肤过敏试验常用以检测Ⅳ型变态(或超敏)反应,也是细胞免疫功能的简易指标,可作为过筛试验。 常用的皮试抗原有结核菌素(OT或PPD)、链激酶-链道酶(SK-SD)、腮腺炎病毒、白念珠菌素等,也可用二硝基氯苯(DNCB)或二硝基氟苯(DNFB)作皮肤涂敷(不可作皮内注射)。植物血凝素(PHA)皮试的可靠性尚有争议。临床上宜用几种抗原同时做皮试,若均呈阴性者提示患者细胞免疫功能减低或缺如,需作进一步检查。
②T细胞计数检测。
又分为CD3细胞计数检测T细胞亚群检测。
CD3抗原可作为成熟T细胞表面(小部分活化的NK细胞也有)。以单抗和免疫荧光技术,用荧光显微镜或流式细胞仪进行计数。正常值为54%~74%。
T 细胞主要有CD4和CD8二个亚群。按分泌细胞因子不同,CD4细胞又分为Th0、Thl、Th2和Th3四种亚群。Thl细胞有辅助CD8T细胞分化成熟,Thl细胞能增强细胞介导的免疫;Th2细胞主要辅助B细胞生成抗体以及抑制Thl细胞功能,故增强抗体介导的体液免疫;Th3能抑制细胞和体液免疫。CD8T细胞称细胞毒性T(Tc)细胞,它也可分为Tc1、Tc2和Tc3。临床常用的CD系列检查主要包括:CD3, CD4, CD8, CD19, CD16/CD56。可能出现CD4与CD8二种细胞比例变化又是相当复杂的。
③T 细胞功能检测。
临床上非常规检测的其它T细胞功能试验有:T辅助细胞或抑制细胞功能检测、测定T细胞产生细胞因子的水平、T细胞表面IL-1和IL-2等受体测定、对IL-1、IL-2、IL-4或g -干扰素的反应。这些检测主要用于免疫缺陷或免疫失调性疾病的病损环节检查与研究。
④杀伤细胞检测。
自然杀伤细胞又称NK细胞,其主要的功能特征是对肿瘤细胞及病毒感染细胞具有非特异性的杀伤力,这种杀伤效应不依赖抗体与补体,体外检测NK细胞活性是诊断NK细胞功能及其与某些疾病关系的一个重要手段。自然释放率要求<10%;正常值:自然杀伤率大约35%~85%,平均值60%。临床意义:K细胞主要分布在腹腔渗出液,外周血、脾脏中;NK细胞主要分布在骨髓、外周血和脾脏中。临床主要用于肿瘤、病毒感染、寄生虫感染、自身免疫和移植免疫等病人,检测其K、NK细胞杀伤功能,在维持和调节特异性免疫中起重要作用。
⑤巨噬细胞功能检测。
巨噬细胞承担着吞噬、消除细胞内寄生菌、真菌,和清除衰老的自身细胞的职能,它在特异性体液免疫或细胞免疫应答中都有重要作用,所以巨噬细胞的吞噬消化功能,在一定程度上可以反映机体的免疫状态。测定巨噬细胞的吞噬功能有体内法和体外法两种。
⑥中性粒细胞功能检测。
又分为细胞运动功能的检测和吞噬和杀菌功能的检测。
细胞运动功能的检测:小吞噬细胞的运动可以分成随机运动和定向运动,前者类似于布朗运动。检测方法是将采集的白细胞悬液滴于玻片上,用光学显微镜直接观察其运动。也可用毛细血管法将细胞悬液装入硅化毛细血管中,稍加离心,使细胞沉积在一端,切去无细胞的毛细血管段,继而移放在含细胞培养液的培养小瓶中,37℃温育18~20h,游动的细胞将从毛细血管内外移,在管口形成一细胞团,根据细胞面积可判断受检中性粒细胞活动的强弱。某些患者中性粒细胞的任意运动明显减弱,甚至消失。中性粒细胞的定向运动表现为趋化运动,测定方法有多种,其原理相同,而方法大同小异。
吞噬和杀菌功能的检测:检测原则是将受检细胞悬液按一定比例混和,继加活的白色念珠菌悬液,保温生,加美蓝溶液作活体染色,取样涂片镜检。
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